微生物實習報告

時間:2024-07-07 14:01:26 實習報告 我要投稿
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微生物實習報告

  在不斷進步的時代,報告與我們的生活緊密相連,寫報告的時候要注意內(nèi)容的完整。你所見過的報告是什么樣的呢?下面是小編精心整理的微生物實習報告,供大家參考借鑒,希望可以幫助到有需要的朋友。

微生物實習報告

微生物實習報告1

  一、實習目的意義

  1、通過實習過程掌握酸奶中乳酸細菌的分離純化;

  2、土壤中自生固N菌分離、純化、生長曲線測定 :通過實習過程,掌握土壤中微生物的分離、純化和生長曲線測定的技術(shù);

  3、參觀臨安青山污水處理廠:參觀污水處理廠,了解其運行模式,以及在污水處理過程中微生物發(fā)揮的作用和技術(shù);

  4、參觀富陽海正藥業(yè)有限公司:了解一個大公司大企業(yè)的運行情況,以及專業(yè)方面的一些技術(shù)和應用。

  二、實習地概況

  1、第一個和第二個實驗是在學校學六實驗室完成的;

  2、第三個實驗:臨安市青山污水處理有限公司成立于20xx年3月21日,于20xx年5月1日投入試運行,是一個集污水收集、處理于一體的公益事業(yè)企業(yè)。公司坐落于浙江省臨安市青山湖街道研口村發(fā)達畈,占地66畝,近期投資8082萬元,建成處理能力2萬噸/日,收集管網(wǎng)42公里,工藝采用MSBR法,具有脫氨除磷功能的污水處理設(shè)施。公司堅持內(nèi)抓管理強素質(zhì),外創(chuàng)先進塑形象,通過規(guī)范化、制度化、精細化、科學化的管理來不斷提高污水處理水平,努力提升科學管理層次,切實增強企業(yè)核心競爭力。公司設(shè)備、工藝先進,技術(shù)力量雄厚,現(xiàn)有職工21人,其中技術(shù)人員15人。公司先后通過了ISO9000和ISO14000質(zhì)量環(huán)境管理體系認證及清潔生產(chǎn)認證。同時被評為浙江省公眾滿意單位杭州市環(huán)境保護模范企業(yè)、臨安市花園式工廠、臨安市安全聲場先進單位、臨安市衛(wèi)生先進單位、臨安市綠色企業(yè)等榮譽稱號。

  3、第四個實驗:占地16000平方米,累計投資超過2.6億元,設(shè)有60多個單元實驗室,集小試、中試與研發(fā)支持為一體 。始創(chuàng)于1956年的浙江海正藥業(yè)股份有限公司秉承“執(zhí)著藥物創(chuàng)新,成就健康夢想”的使命和“成為廣受尊重的全球化制藥企業(yè)”的愿景,致力于整合藥物研發(fā)與生產(chǎn)資源,為全球客戶提供更好的產(chǎn)品和服務(wù),通過美國FDA、歐盟EDQM、澳大利亞TGA、韓國KFDA等官方認證的品種達到40多個,銷往全球30多個國家和地區(qū)。

  20xx年,公司榮獲“全國五一勞動獎狀”,海正、HISUN及圖形被認定為“中國馳名商標”,入選“中國萬種微生物基因組計劃”和“國家重大(磅)級藥物品種產(chǎn)業(yè)化技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)盟”。因圓滿完成“抗甲流藥物中間體生產(chǎn)”的國家任務(wù),受到省政府的通令嘉獎。

  20xx年,公司入選浙江省醫(yī)藥工業(yè)“十強企業(yè)”,并榮獲“國內(nèi)最佳產(chǎn)品線十佳工業(yè)企業(yè)” 稱號,同時被譽為“金蜜蜂獎成長型企業(yè)”。我們主要參觀了海正藥業(yè)在富陽的分公司。

  三、材料方法

  1、材料:乳酸細菌培養(yǎng)基、酸奶

  原理:當乳酸菌生長代謝出乳酸后,會是PH下降而使顏色由綠變?yōu)辄S綠,也由于PH值降低,再加上抗生素及厭氧培養(yǎng)的作用,所以一般的微生物不容易在此培養(yǎng)基上生長。因此十分容易鑒別乳酸菌。

  方法 :

  1.1 (6月7日)配備乳酸細菌培養(yǎng)基(蛋白胨10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,檸檬酸氫二銨2.0G,葡萄糖20.0G,吐溫80 1.0ML,乙酸鈉5.0G,磷酸氫二鉀2.0G,硫酸鎂0.58G,硫酸錳0.25G,瓊脂18.0G,蒸餾水1000ML,PH 6.2―6.6)

  1.2 (6月7日)培養(yǎng)基滅菌

  1.3 (6月8日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的培養(yǎng)基到成平板

  1.4 (6月8日)用滅菌過的接種環(huán)挑取酸奶在平板上劃線純化培養(yǎng)4天左右

  1.5 (6月12日)挑取平板上菌落制成臨時裝片觀察

  2、材料:阿須貝無氮培養(yǎng)基、土壤

  方法:

  2.1 (6月12日)配備阿須貝無氮培養(yǎng)基(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,瓊脂18G,蒸餾1000ML,PH7.2) 阿須貝無氮培養(yǎng)液(葡萄糖10.0G, 磷酸氫二鉀0.2G, 硫酸鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,蒸餾水1000ML,PH7.2)

  2.2 (6月12日)培養(yǎng)基,培養(yǎng)液滅菌

  2.3 (6月12日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的阿須貝無氮培養(yǎng)基到成平板

  2.4 (6月12日)用滅菌過的鑷子將黃豆大小的菜園土埋入已冷凝的平板培養(yǎng)基上

  2.5 (6月12日)正面放置28度培養(yǎng)4天

  2.6 (6月18日)用滅菌過的接種環(huán)挑取菌苔在新的阿須貝平板上劃線純化32度 培養(yǎng)

  2.7 (6月20日)單菌落接入液體培養(yǎng)基中于12.24.36.48H后測吸光值.制備生長曲線

  四、結(jié)果分析

  平板上有一個個單菌落.在顯微鏡下觀察單菌落就只有一種乳酸菌。酸奶中有保加利亞乳菌與嗜熱鏈球菌二種。

  五、實習感受

  通過此次實習,我學到了很多課堂上學不到的東西:親自動手配培養(yǎng)基,分離、純化菌類,學會使用分光光度計制作生長曲線,同時參觀了一些與微生物緊密相連的公司,了解其運行模式、實踐技術(shù)和應用。這讓我清楚地感到了自己肩上的重任,看清了自己的人生方向,也讓我認識到了科研工作應支持仔細認真的工作態(tài)度,要有一種平和的心態(tài)和不恥下問的精神,不管遇到什么事都要去思考,多聽別人的建議,不要太過急燥,要對自己所做的事去負責,不要輕易地去承諾,承諾了就要努力去兌現(xiàn)。實習也培養(yǎng)了我的實際動手能力,增加了實際的操作經(jīng)驗,對實際的科研工作的有了一個新的開始,更好地為我們今后的工作積累經(jīng)驗。

  我知道科研工作是一項需要熱情的事業(yè),并且要持之以恒的精神和吃苦耐勞的品質(zhì)。我覺得重要的是在這段實習期間里,我第一次真正地接觸了實驗,在實踐中了解了一些科研技術(shù),并且在此期間,我參觀了一些公司,也與社會有所接觸。利用這次難得的機會,也打開了視野,增長了見識,為我們以后進一步走向社會打下堅實的`基礎(chǔ)。

  實習期間,我從末出現(xiàn)無故缺勤。我認真聽取老師的指導,對于別人提出的實驗建議虛心聽取,并能夠仔細觀察、切身體驗、獨立思考、綜合分析,并努力把學到的知道應用到實際實驗操作中去,盡力做到理論和實際相結(jié)合的最佳狀態(tài),培養(yǎng)了我的耐心和素質(zhì)。

  為期兩個多星期的實習結(jié)束了,我在兩個多星期的實習中學到了很多在課堂上根本就學不到的知識,受益匪淺。回想自己在這期間的實習情況,也有不足之處。對此我思考過,學習經(jīng)驗自然是一個因素,然而更重要的是心態(tài)的轉(zhuǎn)變沒有做到位,有些實驗步驟還是停留在應付的層面上,F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了這個不足之處,應該還算是及時吧,因為我明白了何謂工作何謂實際。在接下來的日子里,我會朝這個方向努力,在實驗操作方面我會更加謹慎。

  本次實習是我第一次親身感受了所學知識與實際的應用,理論與實際的相結(jié)合,讓我們大開 眼界,也算是對以前所學知識的一個初審吧!這次實習對于我們以后學習、找工作也真是受益匪淺。 我會把這此實習作為我人生的起點,在以后的工作學習中不斷要求自己,完善自己,讓自己做的更好。

微生物實習報告2

  姓名:初旭

  班級:食品12-3班

  學號:120424301

  指導教師:歐陽杰

  實習一 牛欄山酒廠

  一. 實習目的

  1. 了解牛欄山酒廠的歷史和酒文化

  2. 通過參觀了解白酒的制作工藝流程

  二.實習地點

  北京市順義區(qū)牛欄山酒廠

  三.相關(guān)企業(yè)介紹

  牛欄山酒廠,中國歷史悠久的釀酒廠之一。依據(jù)現(xiàn)保存在順義檔案館的《順義縣志》記載,從有詳細釀酒歷史記載的康熙五十八年(1719)年算起,釀酒古鎮(zhèn)牛欄山的“酒齡”已近300年。據(jù)民國20年《順義縣志·實業(yè)志》載:“牛欄山鎮(zhèn)造酒工作是工者約百余人(受雇于治內(nèi)十一家燒鍋),所釀之酒甘冽異常為北平特產(chǎn),銷售鄰縣或平市,頗膾炙人口,而尤以牛欄山之酒為最著”。

  牛欄山酒廠自1952年在“公利號”、“富順成”、“魁勝號”、“義信號”四家老燒鍋的基礎(chǔ)上成立建廠,現(xiàn)已發(fā)展成為國有大型企業(yè),總資產(chǎn)達5.1億元,是北京市年產(chǎn)白酒5萬噸以上的生產(chǎn)廠家之一。企業(yè)現(xiàn)有干部職工1500余人,主要生產(chǎn)以“牛欄山”牌二鍋頭等共計170余種酒類產(chǎn)品,產(chǎn)品深受消費者青瞇。

  四.牛欄山二鍋頭基本概述

  牛欄山二鍋頭,二鍋頭之宗。二鍋頭作為京酒的.代表,已有八百多年的歷史。京師釀酒師蒸酒時,去第一鍋“酒頭”,棄第三鍋“酒尾”,“掐頭去尾取中段”,唯取第二鍋之貴釀。牛欄山二鍋頭,宗氣一脈相傳,于20xx年9月4日榮獲“國家二鍋頭原產(chǎn)地認證”。

  二鍋頭酒選用高粱為主要原料,還是以麩曲和酵母為糖化發(fā)酵劑,采用傳統(tǒng)的“老五甑”工藝,經(jīng)原料清蒸、輔料清蒸,低溫入池,適當發(fā)醇,火蒸餾,掐頭去尾,貯陳精釀而成。

  由于二鍋頭酒的酒液清亮透明,香氣芬芳,酒質(zhì)醇厚,入口甘潤、爽洌,酒力強勁,后勁綿長,回味悠長,因此備受廣大消費者的認可,二鍋頭品牌家族也日漸豐富。

  牛欄山二鍋頭的發(fā)酵,仍沿用古老的“地缸”發(fā)酵法,恪守傳統(tǒng)的“清蒸清燒”釀造工藝。從潤料、糊化到入池發(fā)酵,十多道傳統(tǒng)工藝,下足精致工夫。充分保證,地道二鍋頭之清、香、爽、凈。

  五.生產(chǎn)原料和設(shè)備

  主料:高粱(東北高粱)、玉米、大麥、水(深層地下水)

  輔料:豌豆、酒曲

  設(shè)備:主要有發(fā)酵設(shè)備、釀造設(shè)備、蒸餾設(shè)備、灌裝設(shè)備等。

  六.生產(chǎn)工藝和流程

  1.生產(chǎn)工藝

  采用續(xù)碴清香型曲酒生產(chǎn)工藝。

  所謂續(xù)碴法是將米碴子(指粉碎后的生原科)蒸料后, 取出酒醅(又稱母糟, 指已發(fā)酵的固態(tài)醅, 將米碴子和酒醅混合后, 在甑桶內(nèi)同時進行蒸酒和蒸料(這種操作稱混燒), 然后加曲繼續(xù)發(fā)酵, 如此反復進行。由于生產(chǎn)過程一直在加入新料及曲, 故稱續(xù)碴發(fā)酵法。

  其具體工藝流程如下:

  工藝流程圖

  2.發(fā)酵類型

  采用的是固態(tài)發(fā)酵法:其工藝特點是全部釀酒過程的物料流轉(zhuǎn)都在固體狀態(tài)下進行,發(fā)酵容器主要采用地缸、窖池、大木桶等發(fā)酵設(shè)備,多采用甑桶蒸餾。固態(tài)發(fā)酵的酒質(zhì)較好。

  3. 過程控制

 、賹υ系目刂:高粱是二鍋頭的主要生產(chǎn)原料,酒廠擇優(yōu)于我國高粱主產(chǎn)區(qū)的東北地區(qū),專門建立了優(yōu)質(zhì)原料供應基地,并對原料采取嚴格收購、多次檢測、達標入庫、出庫在檢測等控制方法,保證所有原料均達工藝要求標準。

 、趯λ纯刂疲横勗於侇^使用的是地下三百米處的優(yōu)質(zhì)地下水。按工藝要求。酒廠定期對水質(zhì)進行化驗和檢測,進行反滲透處理。使水質(zhì)達到國家生活飲用水標準,在此基礎(chǔ)上,水中的一些無機鹽以及電導率等指標也要達到釀酒的要求,才能成為合格的釀酒

  用水。

 、蹖凑{(diào)工藝的質(zhì)量控制:目前酒廠盛原酒的容器是陶壇和不銹鋼桶,有效地保證了原酒的長期存放;其勾調(diào)用水需經(jīng)反滲透處理,以保證牛欄山二鍋頭酒的封為特點和優(yōu)良品質(zhì)。

  七.實地參觀照片

  包裝生產(chǎn)線 陳年窖藏

  發(fā)酵車間傳統(tǒng)蒸餾工具——“天鍋”

  八.實習思考題

  1.二鍋頭主要是什么香型?

  答:清香型

  2.酒的起源有哪幾種有意思的傳說?

  儀狄造酒說

  ○相傳夏禹時期的儀狄發(fā)明了釀酒。

  史籍中有多處提到儀狄“作酒而美”、“始作酒醪”的記載,似乎儀狄乃制酒之始祖。公元前二世紀史書《《呂氏春秋》》云:儀狄作酒。漢代《戰(zhàn)國策》則進一步說明:昔者,帝女令儀狄作酒而美,進之禹,禹飲而甘之,日:‘后世必有飲酒而之國者。'遂疏儀狄而絕旨酒(禹乃夏朝帝王)。

  [4]2杜康造酒:關(guān)于杜康造酒 ,歷史文獻多有記載,如《世本》云:“杜康作酒。少康作○

  秫酒!睆埲A《博物志》云:“杜康作酒!鳖櫼巴酢队衿吩疲骸熬疲趴邓!崩铄睹汕蟆吩疲骸岸趴翟炀,倉頡制字。”朱肱《酒經(jīng)》云:“酒之作尚矣。儀狄作酒醪,杜

  康作秫酒。豈以善釀得名,蓋抑始于此耶?”《類書纂要》云:“儀狄作。杜康造。” 3猿猴造酒:○當猿猴采集的花果及谷物,食后剩余而殘留或者散落在石巖中,日久由于微生物侵入,遂自然發(fā)酵成酒。

  3. 牛欄山二鍋頭酒蒸餾時“掐頭去尾”的道理?

  蒸酒時,需將蒸餾而得的酒汽,經(jīng)第一次放入錫鍋內(nèi)的涼水冷卻而流出的“酒頭”和經(jīng)第三次換入錫鍋里的涼水冷卻而流出的“酒尾”提出做其它處理,因為第一鍋和第三鍋冷卻的酒含有多種低沸點的物質(zhì)成分,味道較雜,所以酒廠只摘取味道醇厚的經(jīng)第二次換入錫鍋里的涼水冷卻而流出的酒,故起名為“二鍋頭”。

微生物實習報告3

  歲月如梭,光陰似箭,不知不覺在微生物室實習的時間已經(jīng)結(jié)束了,但收獲頗豐。 通過積極協(xié)助老師完成細菌學方面檢驗項目的同時,自己的基礎(chǔ)操作能力有了很大程度的提高,操作起來熟練了非常多。而且通過染色在顯微鏡下能辨認的細菌也更多了,像球菌科的葡萄球菌感染、鏈球菌、淋球菌以及桿菌科的腸桿菌,真菌孢子在顯微鏡下也能一眼辨認;全片查找結(jié)核桿菌的陽性率也提高了。

  對什么類型的標本應做什么平板接種,培養(yǎng)溫度等也有了進一步的掌握,比如:痰標本應接種在血平板,巧克力平板,沙保平板而且還要做涂片染色以監(jiān)測痰標本的合格程度。血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標本里的基礎(chǔ)菌群的生長狀態(tài),沙保主要觀察是否有念珠菌生長。

  總之在微生物一個月的`實習日子里感覺自己受教頗多,通過親身實踐操作把自己在學校學到的理論知識同實踐很好的結(jié)合了起來,在帶教老師的悉心指導下已熟悉掌握了各類標本的接種、細菌培養(yǎng)以及細菌的初步鑒定、細菌的藥敏試驗等。

微生物實習報告4

  1、目的

  通過實習使學生將理性知識與感性認識有機地結(jié)合,將書本知識用于實驗,在實驗中更深地理解基礎(chǔ)理論,提高學生的綜合能力與創(chuàng)新意識。通過實習,掌握培養(yǎng)基的配制、分裝及滅菌方法;掌握微生物的接種技術(shù);掌握微生物的冷凍干燥保藏方法。

  2、要求

  (1)注重微生物學基礎(chǔ)實驗技能的掌握與提高,克服盲目追求新穎而忽視基礎(chǔ)的傾向;

 。2)課程實習前要預習,明確每次實驗的目的與基本步驟;

 。3)在實驗中要有嚴緊的科學態(tài)度,尊重事實與實驗結(jié)果,要善于發(fā)現(xiàn)新現(xiàn)象;

 。4)樹立密切合作的風氣,包括學生與老師、班與班、組與組、組長與組員之間的密切配合。

  二、實習內(nèi)容

  1、培養(yǎng)基的配制和滅菌。

  2、微生物(金葡菌)的接種。

  3、菌種的(金葡菌)的冷凍干燥保藏方法。

  4、日程安排:

  第一天實習課程的講授;實習工具、儀器和設(shè)備的'準備(包括培養(yǎng)基的配制、倒平板、金葡菌的活化、保護劑的配制)。

  第二天金葡菌由固體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)接至液體培養(yǎng)基;準備第三天的實驗器具。第三天菌種凍干前的預處理。第四天菌種的凍干操作。第五天凍干機關(guān)機,菌種保藏。

  三、主要材料和儀器設(shè)備

  天平、稱量紙、牛角匙、精密pH試紙、量筒、刻度搪瓷杯、試管、三角瓶、漏斗、分裝架、移液槍、培養(yǎng)皿、玻璃棒、燒杯、試管架、剪刀、酒精燈、硅膠塞、線繩、報

  紙、乳膠管、電爐、高壓滅菌鍋、干燥箱、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、金葡菌斜面培養(yǎng)物、接種環(huán)、凍干機、西林瓶、離心機、生化培養(yǎng)箱等。

  四、操作方法

  1.制備培養(yǎng)基

  2.配制保護劑:鮮牛奶3000r/min離心30min,棄去上層脂肪,加9倍體積生理鹽水,分裝,121℃(或116℃)高壓滅菌20min后備用。保護劑的作用可能是在冷凍干燥的脫水過程中代替結(jié)合水而穩(wěn)定細胞成分(細胞膜)的構(gòu)型,防止細胞膜因為凍結(jié)而破壞。保護劑還可以起支持作用,使微生物疏松地固定在上面。

  3.包2根離心管、4根大槍頭、2個西林瓶、1根8ml生理鹽水、1根保護劑,121℃滅菌20min。

  4.把菌種從平板培養(yǎng)物接種至平板培養(yǎng)基(菌種的活化):

  (1)把接種環(huán)放在酒精燈上消毒,消毒時應使接種環(huán)完全燒紅;

 。2)待接種環(huán)冷卻后,用接種環(huán)從平板上沾取少許菌苔;

  (3)然后用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基上畫線;

 。4)把平板培養(yǎng)基拿去37℃培養(yǎng)24h

  5.把菌種從平板培養(yǎng)物接種至液體培養(yǎng)基(液體接種法):

 。1)用接種環(huán)從平板上沾取少許菌苔;

 。2)在管內(nèi)靠近液面試管壁上將菌苔輕輕研磨并輕輕振蕩,或?qū)⒔臃N環(huán)在液體內(nèi)振搖幾次;

 。3)將液體肉湯培養(yǎng)基150r/min搖床37℃培養(yǎng)24h。

  接種液體培養(yǎng)物時應特別注意勿使菌液濺在工作臺上或其他器皿上,以免造成污染。如有濺污,可用酒精棉球灼燒滅菌后,再用消毒液擦凈。凡吸過菌液的吸管或滴管,應立即放入盛有消毒液的容器內(nèi)。

  6.把滅菌物品烘干備用

  7.拿出液體培養(yǎng)基:取出5ml菌液放入無菌離心管4000r/min離心20min,傾去上清液,再用5ml無菌生理鹽水將菌泥重新懸浮,再次4000r/min離心20min,傾去上清液,用5ml滅菌保護劑將菌泥重新懸浮,之后就可以分裝入西林瓶,每瓶1ml(液面高度3~5mm)。

  8.預凍:分裝好的菌種管放-80℃預凍2h,同時開啟凍干機的制冷機,也可在凍干機的冷阱中預凍菌種。

  9.凍干:當凍干機冷阱溫度達到-40℃時,將預凍好的西林瓶放進壓蓋干燥架中,

  把假蓋板放在冷阱上,再將干燥架放在冷阱上方,罩上壓蓋有機玻璃罩,罩下端要與“O”型密封圈完全接觸。順時針擰緊真空閥,按“真空計”鍵,顯示真空度為100~110×103,再按“真空泵”鍵,真空泵工作(真空泵的蓋子要打開),15Pa以下為正常,凍干開始。10.壓蓋:24h后,視感物料已完全干燥,按順時針方向轉(zhuǎn)動有機玻璃罩上方手柄,使罩中壓蓋架絲杠轉(zhuǎn)動下移,將瓶蓋壓入瓶中,實現(xiàn)在真空中壓蓋。

  11.關(guān)機:按逆時針方向打開真空閥充氣,按“真空泵”鍵,真空泵停止運轉(zhuǎn)。取下有機玻璃罩,拿出西林瓶保存。

  五、注意事項

  需滅菌的物品應嚴格滅菌,避免污染雜菌;2.接種時應該要等接種環(huán)完全冷卻后再接種;

  3.凍干時,西林瓶的蓋子一定要放好,即使西林瓶中的空氣可以出來形成真空,又能在壓蓋的時候可以把蓋子蓋好。

  六、實習結(jié)果

  上圖中蓋子已經(jīng)掉了的和西林瓶中還是液體的都是實驗失敗的,蓋子即沒掉瓶子中的菌種又是粉末狀的為實驗成功的。

  蓋子掉了的:是因為抽氣時,氣流流動使瓶子掉下來。

  瓶子中還是液體的:是因為蓋子蓋的太緊,瓶中的空氣抽不出來,水分也沒抽出,導致瓶子中的菌種未變成粉末狀。

  七、實習總結(jié)或體會

  通過這個實習,掌握了培養(yǎng)基的配制、分裝及滅菌方法;掌握了微生物的接種技術(shù);掌握了微生物的冷凍干燥保藏方法。通過實習將理性知識與感性認識有機地結(jié)合,將書本知識用于實驗,在實驗中更深地理解基礎(chǔ)理論,明白了需滅菌的物品應嚴格滅菌,避免污染雜。也讓我的綜合能力與創(chuàng)新意識得到了提高。

微生物實習報告5

  一.實習目的

  為了使學生能夠理論聯(lián)系實際,通過親自實地解剖感染小鼠,對小鼠的心、肝、脾進行麥康凱瓊脂平板劃線培養(yǎng),以柯赫法則為這次實習的主線,達到鑒定出小鼠感染的菌種的目的,熟練運用微生物實驗課的所涉及的實驗操作和方法,提高實驗動手能力,分析實驗過程中可能出現(xiàn)的問題,并解決問題。特開設(shè)微生物教學實習,掌握基本技能,加深理論部分的理解,能夠獨立診斷出傳染病病菌,獲得嚴謹?shù)目茖W實驗素養(yǎng)。

  二.實習材料

  實驗動物:一只被感染小鼠,一只健康小鼠

  實驗器械,主要包括:小鼠解剖工具手術(shù)剪、鑷子、蠟盤、釘子,接種棒、酒精燈、打火機、記號筆、手套、載玻片、槍頭、注射器、離心管。

  實驗材料:麥康凱瓊脂平板、各種染色液(結(jié)晶紫溶液、碘溶液、酒精、沙黃水)、蒸餾水、培養(yǎng)基(普通肉湯培養(yǎng)基、蛋白胨培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基)、PBS重懸液、生化試驗材料(微量發(fā)酵管(葡、乳、枸、尿素、麥、甘醇、蔗、硫)、對二甲基氨基苯甲醛、乙醚、甲基紅、vp甲乙液)。

  實驗主要儀器:離心機,分光光度器,溫箱,搖床,超凈工作臺

  三.實習內(nèi)容

  以柯赫法則為主線,通過對感染小鼠的剖解采樣、分離培養(yǎng)、鏡檢、擴增培養(yǎng),然后把得到的純培養(yǎng)物對健康小鼠進行再次接種以獲得被感染小鼠,再次重復以上操作,把獲得的純培養(yǎng)物通過鏡檢觀察和做生化實驗來鑒定出感染小鼠的致病菌。

  四.實習操作進程

  第一天:實驗設(shè)計、討論癥狀、分離剖解

  1 實驗設(shè)計:以小組為單位進行實驗設(shè)計,明確此次實驗主要法則是:柯赫法則。在老師的指導下確定此次實習的主要步驟,討論實驗中可能遇到的問題以及注意事項。

  2 討論癥狀:比較觀察健康小鼠與病鼠,可見到病鼠一般呈萎靡狀,不活躍。每組領(lǐng)取一只感染小鼠觀察癥狀,體表基本正常。

  3 分離剖解:先將麥康凱瓊脂平板分三區(qū),依次寫上肝、脾、心。右手抓起小鼠尾巴,將小鼠搖暈,采用頸椎脫臼法將小鼠處死。將小鼠尸體仰臥固定于蠟盤上,充分露出胸腹部。先用小鼠腹部柔軟部用剪刀剪一小口,然后從該小口處往上、往下剪將皮毛剝離,剝離腹膜暴露出肝臟和脾,可觀察到有輕微的肝腫脹,顏色變淡。將肝和脾切開一小口,用接種環(huán)取樣,在麥康凱瓊脂平板的相應區(qū)域進行劃線分離。再打開胸腔觀察,可見胸腔有出血現(xiàn)象和凝血塊,剪開心包膜,將心臟切一小口,用接種環(huán)取樣,在麥康凱瓊脂平板的相應區(qū)域進行劃線分離。寫上班級組別,日期,置于溫箱中培養(yǎng)至第二天早上8點。

  第二天:挑取單菌落,鏡檢,擴增培養(yǎng),重懸,測OD配濃度,小鼠腹腔注射

  1 挑取單菌落:觀察麥康凱瓊脂平板上菌落的形態(tài)為圓形,邊緣整齊,表面光滑,暗紅色,圓心處顏色較邊緣淺。挑去單個菌落,畫上記號準備做后續(xù)試驗。

  2 鏡檢:選取所挑選菌落的一半進行抹片。取干凈玻片,滴半滴去離子水,用接種環(huán)挑取菌進行抹片、干燥固定、采用格蘭染色法染色:草酸銨結(jié)晶紫染色1-2’,水洗,革蘭氏碘液媒染1-2’,水洗,95%酒精脫色約30’’-1’,水洗,沙黃水溶液復染10 ’ ’-30 ’ ’,水洗。吸干,鏡檢。觀察到該菌被染成紅色,是格蘭陰性菌。

  3 擴增培養(yǎng):選取剩余的菌接種到肉湯培養(yǎng)基中,置于溫箱培養(yǎng)9個小時至菌的生長對數(shù)期。 4 重懸測OD值配濃度:下午5點左右,將培養(yǎng)的菌轉(zhuǎn)入無菌小管中離心,離心后可見菌沉

  于管底,在超凈工作臺內(nèi)操作,去上清液,用槍頭吸取PBS液至去了上清液的菌管中,反復吹打使其重懸,然后再次離心,去上清,重懸,通過分光光度計測得OD590的值,配成2*10^7CFU濃度的菌液。

  5 小鼠腹腔注射:每組挑選一只健康小鼠,在頭部或尾部做上記號,用右手抓住鼠尾,將其搖暈

  ,令其前爪抓住鐵絲蓋上,然后用左手的拇指和食指捏住小鼠頭頸部皮膚,并翻轉(zhuǎn)左后使其腹部朝上,將其尾巴夾在左手掌與小指之間,右手把持注射器吸取2mL菌液,在股后側(cè)面插入針頭,先刺入皮下,后進入腹腔,注射時阻力,皮膚也無泡隆起。注射完將小鼠放回鼠籠即可。

  第三天:觀察小鼠發(fā)病情況

  小組成員分時間段觀察小鼠感染情況,見小鼠瀕死的盡快解剖接種分離致病菌。若 一整天未見小鼠有異常情況的等第二天解剖

  第四天:剖解劃線培養(yǎng)

  雖然小鼠未見萎靡,由于預訂的感染時間差不多,可以進行解剖接種第一天的操作,

  可見體表有淤血點,剖開的小鼠肝臟流出大量的血液。其余均同第一天的操作,將麥康凱瓊脂平板的上所接的.菌置于溫箱中培養(yǎng)。

  第五天:生化鑒定

  觀察到平板上只有一個較小的暗紅色菌落,挑取該菌落進行擴增培養(yǎng)9小時至細菌生長的對數(shù)期。下午6點觀察,培養(yǎng)液依舊是澄清的,很可能沒有長菌。為做進一步的驗證,進行生化試驗。將該菌接入微量發(fā)酵管()和蛋白胨以及葡萄糖蛋白胨中,培養(yǎng)至第二天看結(jié)果。

  第六天:觀察結(jié)果,整理報告

  生化試驗無任何反應,說明接的菌為雜菌或污物,整理實驗報告并分析失敗原因。

  六.實驗結(jié)果與分析

  此次試驗失敗

  給小鼠攻毒,未能分離出致病菌,因此也無法鑒定出小鼠被感染的病原菌為何種腸桿菌科

  試驗失敗原因可能有:

  1、接種棒火焰消毒后,等待冷卻的時間過短,接種棒接種菌時將菌燙死

  2、由于小鼠的免疫力強,使得感染小鼠的病原菌被免疫掉了,因此未接種到治病菌

  3.給小鼠注射的量或濃度還不夠未能達到使小鼠感染的目的

  4、在第一次從小鼠體內(nèi)分離出來的菌可能不是致病菌,或者麥康凱瓊脂平板上培養(yǎng)出來的 菌落不止一種,而我們挑選到的某一菌落恰好不是致病菌。

  5、在進行腹腔注射時,可能沒有注射到腹腔,而只注射到皮下,或者其它部位。

  6、采樣時可能由于接種環(huán)未完全伸入到心、肝、脾的組織中,或者伸到的組織里 恰好沒有致病菌

  7、可能由于小鼠感染的時間過短,還未達到菌生長曲線的高峰期

  七.思考與總結(jié)

  1 此次試驗失敗的原因有很多在我看來最有可能的原因有以下幾點:

 。1) 小鼠免疫:由于這些小鼠是實驗室的小鼠,長期被用來做各種致病菌的實驗,使得它們獲得一定的免疫,所以雖然注射了足夠使小鼠感染發(fā)病的劑量,但也被小鼠免疫掉了,而無法從小鼠體內(nèi)獲得病料。

 。2) 病料不夠:從學姐那了解到,她們做攻毒實驗的動物,都是將整個組織塊磨碎以后,再接到培養(yǎng)基上,而我們做實驗是只是用接種棒挑取一點,接種棒上粘到的病料比較少或根本沒有,因此培養(yǎng)不出菌。

 。3) 挑取的單菌落未必是致病菌:由于平板上長出可能不止一種菌,因此挑到的單菌落,未必是致病菌。

  2為什么擴增出來的菌不直接注射小鼠,而要經(jīng)過離心?

  因為菌可能會產(chǎn)生毒素,若直接注射可能就無法判斷使小鼠發(fā)病的到底是毒素作用,還是因為病菌在小鼠體內(nèi)繁殖感染而造成的。

  3 腸桿菌科有哪些,特征有哪些?

  學生自我鑒定:

  20xx年5月16號到21號期間進行了維持一周的微生物實習,在微生物實習期間,我能夠做到主動和小組成員交流、合作、解決問題,認真完成實驗操作,學會靈活運用自己的專業(yè)知識解決問題。

  通過這段時期的實習,我們對無菌操作有了進一步的理解,掌握了儀器操作的基本技能,鞏固了理論部分的知識,也了解到公共衛(wèi)生意識的重要性。

  實習不過短短的五天,在這短暫的五天內(nèi),,我們有過發(fā)現(xiàn)時的喜悅,有過解剖小鼠時的緊張,有過培養(yǎng)不出菌時的困惑,但最終我們收獲了知識,也收獲了友誼,在合作中共同進步,在困難中共同進退,一切的困難便能迎刃而解。

  這次微生物實習為我們專業(yè)的繼續(xù)拓展提供了寶貴的經(jīng)驗,為動物醫(yī)學本科專業(yè)的我們學習后續(xù)課程奠定扎實的基礎(chǔ)。

微生物實習報告6

  一、實習目的意義

  1、通過實習過程掌握酸奶中乳酸細菌的分離純化

  2、土壤中自生固N菌分離、純化、生長曲線測定:通過實習過程,掌握土壤中微生物的分離、純化和生長曲線測定的技術(shù);

  3、參觀臨安青山污水處理廠:參觀污水處理廠,了解其運行模式,以及在污水處理過程中微生物發(fā)揮的作用和技術(shù);

  4、參觀富陽海正藥業(yè)有限公司:了解一個大公司大企業(yè)的運行情況,以及專業(yè)方面的一些技術(shù)和應用。

  二、實習地概況

  1、第一個和第二個實驗是在學校學六實驗室完成的;

  2、第三個實驗:臨安市青山污水處理有限公司成立于20xx年3月21日,于20xx年5月1日投入試運行,是一個集污水收集、處理于一體的公益事業(yè)企業(yè)。公司坐落于浙江省臨安市青山湖街道研口村發(fā)達畈,占地66畝,近期投資8082萬元,建成處理能力2萬噸/日,收集管網(wǎng)42公里,工藝采用MSBR法,具有脫氨除磷功能的污水處理設(shè)施。公司堅持內(nèi)抓管理強素質(zhì),外創(chuàng)先進塑形象,通過規(guī)范化、制度化、精細化、科學化的管理來不斷提高污水處理水平,努力提升科學管理層次,切實增強企業(yè)核心競爭力。公司設(shè)備、工藝先進,技術(shù)力量雄厚,現(xiàn)有職工21人,其中技術(shù)人員15人。公司先后通過了ISO9000和ISO14000質(zhì)量環(huán)境管理體系認證及清潔生產(chǎn)認證。同時被評為浙江省公眾滿意單位杭州市環(huán)境保護模范企業(yè)、臨安市花園式工廠、臨安市安全聲場先進單位、臨安市衛(wèi)生先進單位、臨安市綠色企業(yè)等榮譽稱號。

  3、第四個實驗:占地16000平方米,累計投資超過2.6億元,設(shè)有60多個單元實驗室,集小試、中試與研發(fā)支持為一體。始創(chuàng)于1956年的浙江海正藥業(yè)股份有限公司秉承“執(zhí)著藥物創(chuàng)新,成就健康夢想”的使命和“成為廣受尊重的全球化制藥企業(yè)”的愿景,致力于整合藥物研發(fā)與生產(chǎn)資源,為全球客戶提供更好的產(chǎn)品和服務(wù),通過美國FDA、歐盟EDQM、澳大利亞TGA、韓國KFDA等官方認證的品種達到40多個,銷往全球30多個國家和地區(qū)。

  20xx年,公司榮獲“全國五一勞動獎狀”,海正、HISUN及圖形被認定為“中國馳名商標”,入選“中國萬種微生物基因組計劃”和“國家重大(磅)級藥物品種產(chǎn)業(yè)化技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)盟”。因圓滿完成“抗甲流藥物中間體生產(chǎn)”的國家任務(wù),受到省政府的通令嘉獎。

  20xx年,公司入選浙江省醫(yī)藥工業(yè)“十強企業(yè)”,并榮獲“國內(nèi)最佳產(chǎn)品線十佳工業(yè)企業(yè)”稱號,同時被譽為“金蜜蜂獎成長型企業(yè)”。

  我們主要參觀了海正藥業(yè)在富陽的分公司。

  三、材料方法

  1、材料:乳酸細菌培養(yǎng)基、酸奶

  原理:當乳酸菌生長代謝出乳酸后,會是PH下降而使顏色由綠變?yōu)辄S綠,也由于PH

  值降低,再加上抗生素及厭氧培養(yǎng)的作用,所以一般的微生物不容易在此培養(yǎng)基上生長。因此十分容易鑒別乳酸菌。

  方法:1.1(6月7日)配備乳酸細菌培養(yǎng)基(蛋白胨10.0G,牛肉膏10.0G,酵母膏5.0G,

  檸檬酸氫二銨2.0G,葡萄糖20.0G,吐溫801.0ML,乙酸鈉5.0G,磷酸氫二鉀2.0G,硫酸鎂0.58G,硫酸錳0.25G,瓊脂18.0G,蒸餾水1000ML,PH6.26.6)

  1.2(6月7日)培養(yǎng)基滅菌

  1.3(6月8日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的培養(yǎng)基到成平板

  1.4(6月8日)用滅菌過的接種環(huán)挑取酸奶在平板上劃線純化培養(yǎng)4天左右1.5(6月12日)挑取平板上菌落制成臨時裝片觀察

  2、材料:阿須貝無氮培養(yǎng)基、土壤

  方法:2.1(6月12日)配備阿須貝無氮培養(yǎng)基(葡萄糖10.0G,磷酸氫二鉀0.2G,硫酸

  鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,瓊脂18G,蒸餾水1000ML,PH7.2)阿須貝無氮培養(yǎng)液(葡萄糖10.0G,磷酸氫二鉀0.2G,硫酸鎂0.2G,氯化鈉0.2G,CaSO4’2H2O;0.1G,碳酸鈣5G,蒸餾水1000ML,PH7.2)

  2.2(6月12日)培養(yǎng)基,培養(yǎng)液滅菌

  2.3(6月12日)用滅菌后冷卻至50攝示度左右的阿須貝無氮培養(yǎng)基到成平板2.4(6月12日)用滅菌過的鑷子將黃豆大小的菜園土埋入已冷凝的平板培養(yǎng)基上2.5(6月12日)正面放置28度培養(yǎng)4天

  2.6(6月18日)用滅菌過的接種環(huán)挑取菌苔在新的阿須貝平板上劃線純化32度

  培養(yǎng)

  2.7(6月20日)單菌落接入液體培養(yǎng)基中于12.24.36.48H后測吸光值.制備生長

  曲線

  四、結(jié)果分析

  1.平板上有一個個單菌落.在顯微鏡下觀察單菌落就只有一種乳酸菌.酸奶中有保加利亞乳菌與嗜熱鏈球菌二種

  五、實習感受

  通過此次實習,我學到了很多課堂上學不到的東西:親自動手配培養(yǎng)基,分離、純化菌類,

  學會使用分光光度計制作生長曲線,同時參觀了一些與微生物緊密相連的公司,了解其運行模式、實踐技術(shù)和應用。這讓我清楚地感到了自己肩上的重任,看清了自己的人生方向,也讓我認識到了科研工作應支持仔細認真的工作態(tài)度,要有一種平和的心態(tài)和不恥下問的精神,不管遇到什么事都要去思考,多聽別人的建議,不要太過急燥,要對自己所做的事去負責,不要輕易地去承諾,承諾了就要努力去兌現(xiàn)。實習也培養(yǎng)了我的實際動手能力,增加了實際的操作經(jīng)驗,對實際的科研工作的有了一個新的開始,更好地為我們今后的工作積累經(jīng)驗。

  我知道科研工作是一項需要熱情的事業(yè),并且要持之以恒的精神和吃苦耐勞的品質(zhì)。我覺得重要的是在這段實習期間里,我第一次真正地接觸了實驗,在實踐中了解了一些科研技術(shù),并且在此期間,我參觀了一些公司,也與社會有所接觸。利用這次難得的機會,也打開了視野,增長了見識,為我們以后進一步走向社會打下堅實的'基礎(chǔ)。

  實習期間,我從末出現(xiàn)無故缺勤。我認真聽取老師的指導,對于別人提出的實驗建議虛心聽取,并能夠仔細觀察、切身體驗、獨立思考、綜合分析,并努力把學到的知道應用到實際實驗操作中去,盡力做到理論和實際相結(jié)合的最佳狀態(tài),培養(yǎng)了我的耐心和素質(zhì)。

  為期兩個多星期的實習結(jié)束了,我在兩個多星期的實習中學到了很多在課堂上根本就學不到的知識,受益匪淺;叵胱约涸谶@期間的實習情況,也有不足之處。對此我思考過,學習經(jīng)驗自然是一個因素,然而更重要的是心態(tài)的轉(zhuǎn)變沒有做到位,有些實驗步驟還是停留在應付的層面上,F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)了這個不足之處,應該還算是及時吧,因為我明白了何謂工作何謂實際。在接下來的日子里,我會朝這個方向努力,在實驗操作方面我會更加謹慎。

  本次實習是我第一次親身感受了所學知識與實際的應用,理論與實際的相結(jié)合,讓我們大開眼界,也算是對以前所學知識的一個初審吧!這次實習對于我們以后學習、找工作也真是受益匪淺。我會把這此實習作為我人生的起點,在以后的工作學習中不斷要求自己,完善自己,讓自己做的更好。

微生物實習報告7

  一、實習時間:20xx.6.7-6.12

  二、實習地點:食品發(fā)酵實驗室(化學樓119、123)、食品學院實習基地

  三、實習目的:

  1、學習自制酸奶的方法,熟悉從酸奶中分離和純化乳酸菌的一般方法。

  2、掌握各類酸奶生產(chǎn)的基本工藝和要求。

  3、學習奶酒的發(fā)酵過程、工藝流程,及其注意事項。

  4、對自己所學的科學知識進一步深化,提高實踐能力,整體策劃部署能力,動手能力,組織能力,團體協(xié)作能力,創(chuàng)新能力等方面也有一些提高。

  四、實習內(nèi)容:

  1.酵母菌篩選方案的確定

  為了獲得最佳酵母菌發(fā)酵結(jié)果,我們通過對Internet資源以及圖書資料的搜索和查尋,查的產(chǎn)酯酵母廣泛應用于白酒、黃酒、普通酒、醋、醬油中,另外,還應用于果汁中。

  所以我們準備了三種菌種來源材料:果皮、酒曲、保藏的酵母斜面。第一種方法是利用果皮做來源,將削下的果皮放入帶玻璃珠的三角瓶充分振搖,梯度稀釋,涂布于YPD瓊脂培養(yǎng)基上。第二種方法是用各種酒曲做為菌種來源,將酒曲粉碎,稱量,梯度稀釋,而后涂布于YPD瓊脂培養(yǎng)基上。第三種方法是利用保藏的酵母斜面作為菌種來源,用接種環(huán)在酵母斜面上取一環(huán)菌,而后用劃線法接種于YPD瓊脂平板上,帶用于實驗。

  經(jīng)過大家的討論后,一致決定利用酵母斜面上的菌種,對其進行培養(yǎng)。因為利用酵母斜面上的菌種在此次實習中可以用到我們實驗上所學習的知識,真正將知識用于實踐,并在實踐中得到鞏固。但是,酵母斜面上的酵母菌制得的菌懸液濃度很大,所以在菌種篩選方面,我們將菌懸液10進制稀釋到10-5,10-6,10-7的數(shù)量級,各濃度涂布兩個平板,另六個平板用于劃線分離法進行菌種分離,30度培養(yǎng)24到48h,觀察平板上的菌落生長情況。初選出酵母菌,將菌落照片后就進行顯微鏡觀察,篩選到典型的酵母菌株,進行生化實驗。將平板上的酵母單菌落接種保藏于斜面培養(yǎng)基(PDA),30度培養(yǎng)48h后,4度冷藏。將PDA斜面培養(yǎng)基上保存的酵母菌接種于培養(yǎng)液中培養(yǎng),而后接種于豆芽汁發(fā)酵液中,進行發(fā)酵測產(chǎn)脂能力。

  2.酵母菌的篩選及鑒定

  11月25日我們按照討論決定的方案進行了酵母菌的篩選實驗,實驗內(nèi)容如下:

  2.1 培養(yǎng)基的制備、分裝、滅菌(分述在下文中)

  在實習中共需要準備六種培養(yǎng)基:YPD培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、豆芽汁培養(yǎng)基、葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣培養(yǎng)基、硝酸鹽生化實驗培養(yǎng)基、糖發(fā)酵實驗培養(yǎng)基。各培養(yǎng)基配方如下:

  1、YPD培養(yǎng)基:1%酵母膏,2%蛋白胨,2%葡萄糖,2%瓊脂。

  2、PDA培養(yǎng)基:2%馬鈴薯,2%葡萄糖,22%瓊脂。

  秤取切成小塊的馬鈴薯,加水煮爛(20-30min),八層紗布過濾,濾液中加入葡萄糖,最后加入瓊脂。

  3、豆芽汁培養(yǎng)基:10%黃豆芽,2%葡萄糖,2%瓊脂

  洗凈豆芽,加水煮沸30min.用紗布過濾。濾液加入瓊脂,加熱溶解后放入糖,攪拌使它溶解,補水至設(shè)定值。

  4、糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣培養(yǎng)基:營養(yǎng)物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化

  鈉,0.2%磷酸氫鈉,0.2%溴麝香草酚藍)配方為20g/1000ml,蒸餾水配制,pH7.4。分裝后加葡萄糖0.5%。

  5、硝酸鹽生化實驗培養(yǎng)基:0.3%牛肉浸膏,0.5%-1%蛋白胨,pH7.0(100ml 培養(yǎng)基加入1g硝酸鉀)

  6、糖發(fā)酵實驗培養(yǎng)基:營養(yǎng)物(0.5%牛肉膏,1%蛋白胨,0.3%氯化鈉, 0.2%磷酸氫鈉,0.2%溴麝香草酚藍)配方為20g/1000ml,蒸餾水配制,pH7.4。分裝后加乳糖0.5%。

  制備:由于第6種培養(yǎng)基同第4種培養(yǎng)基,則一組配制即可,再加上無菌水,共需制備六種,則將全班分成六個組,我們?yōu)榈?組,故配制過程如下:

 。1)天平調(diào)平。

 。2)準確秤取7.8g營養(yǎng)物(配390ml),葡萄糖、蔗糖、乳糖各0.65g。

 。3)將營養(yǎng)物放入搪瓷缸中,加入390ml蒸餾水,玻璃棒攪拌將其溶解。

 。4)pH試紙測其pH是否為7.4,若不是,用氫氧化鈉溶液調(diào)到7.4。分裝:

 。1)取三個250ml錐形瓶,每個錐形瓶中倒入130ml的上述溶液。

 。2)將上述稱好的葡萄糖、蔗糖、乳糖分別倒入三個錐形瓶中,搖晃錐形瓶使其溶解。

 。3)將加入糖的營養(yǎng)液分別裝入12個試管中,每個試管用移液管放入10ml。

 。4)將每兩個葡萄糖、蔗糖、乳糖用牛皮紙扎成一捆,即每6個試管扎成一捆,寫上班級、組別后待滅菌。

  滅菌:將已經(jīng)包扎好的試管放入滅菌箱中,進行滅菌待用。

  以上就是我們組的制備過程,在這個過程中應該注意以下幾點:

  1、稱量前天平要調(diào)平。

  2、秤取營養(yǎng)物時應準確秤取。

  3、溶解后注意調(diào)pH值到7.4

  4、量取培養(yǎng)液時要準確,特別是向試管中分裝時要用移液管。

  2.2 酵母菌的分離(詳述分離方法,培養(yǎng)條件及觀察到的菌落結(jié)果)

  步驟過程:

  1、倒平板:待YPD培養(yǎng)基冷卻至50度左右后,按無菌操作法倒12只平板(每皿約倒15ml),平置,待凝。

  2、酵母菌稀釋:取1mL菌懸液放入裝有99ml的無菌水錐形瓶中,搖勻后再從錐形瓶中取1mL放入1號管,依次進行,則管里酵母的濃度依次是10-2~10-7。

  3、平板分離:依次從10-7,10-6,10-5的管里取稀釋液進行涂布平板,YPD平板每個濃度涂兩個。

  4、劃線法分離:用接種環(huán)從酵母斜面上取一環(huán)酵母,在酒精燈前按無菌操作法進行劃線,將酵母接種于6個平板中。

  5、恒溫培養(yǎng):將12個培養(yǎng)皿平板置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)24~48小時。 結(jié)果:

  觀察菌落:出現(xiàn)了4種不同形態(tài)的菌落。

  ①圓形,菌落大,表面光滑,濕潤,突起,乳白色。

  ②圓形,菌落略小,濕潤,突起,質(zhì)地均勻,呈乳白色。

  ③橢圓形,菌落略小,濕潤,突起,顏色均一,呈乳白色。

 、軝E圓形,菌落大,濕潤,突起,顏色均一,呈乳白色。

  結(jié)果分析:

  通過網(wǎng)上查閱資料顯示,正常條件下大多數(shù)酵母菌的菌落特征與細菌相似,但比細菌菌落大而厚,菌落表面光滑、濕潤、粘稠,容易挑起,菌落質(zhì)地均勻,正反面和邊緣、中央部位的顏色都很均一,菌落多為乳白色,少數(shù)為紅色,個別為黑色。 啤酒酵母的菌落紅酵母的菌落各種酵母菌的菌落。

  將我們觀察的結(jié)果與資料相比,確實符合大多數(shù)酵母菌的菌落形態(tài)。 結(jié)論:觀察到的是酵母菌落。

  2.3酵母菌的初步鑒定(包括革蘭氏染色和糖代謝實驗)

  2.3.1將平板上分離到的各菌株進行簡單染色后進行鏡檢

  觀察結(jié)果為:

  球菌,各個細胞的形狀比較規(guī)整。

  結(jié)論:

  通過菌體個體形態(tài)和菌落形態(tài),初步確定出了一株酵母菌。

  注意事項:

  1、搬動顯微鏡時應一手握住鏡臂,另一手托住底座,鏡身保持直立,并緊靠身體,步態(tài)穩(wěn)健。切記單手拎提,以免目鏡頭從鏡筒上掉出而砸壞。

  2、各個鏡面切忌用手涂抹,以免手上的`油、汗污染鏡面,造成發(fā)霉、腐蝕。

  2.3.2 將初步確定的菌株進行生化實驗

  步驟過程:

  用接種環(huán)從平板上挑取已分離的同一菌落接種于糖發(fā)酵管和硝酸鹽生化管中,接種完后30℃培養(yǎng)。24小時后觀察結(jié)果。

  與此同時,將平板上的酵母單菌落接種保藏于斜面培養(yǎng)基(PDA),30度培養(yǎng)48小時后,4度冷藏,待檢其他特性。

  結(jié)果:

  驗中并沒有觀察到,但硝酸鹽管中變黃,則分析結(jié)果,可能是酵母菌生長不旺盛,導致即使產(chǎn)氣也看不出來。

  根據(jù)這一現(xiàn)象,能夠說明該菌株具有產(chǎn)酸產(chǎn)氣性能,確定此菌株確實是酵母菌。

  3、發(fā)酵產(chǎn)酯實驗(11.23-11.24)

  步驟過程:

 。1)準確吸取25ml發(fā)酵液于250ml錐形瓶中,加入25ml蒸餾水,滴2滴酚酞指示劑,用0.1mol/L的氫氧化鈉滴至微紅色,記下消耗氫氧化鈉溶液的體積。

 。2)將滴定后的發(fā)酵液轉(zhuǎn)移至250ml錐形瓶中,準確加入15ml上述氫氧化鈉標液,接上冷凝管,加熱至沸回流30min。

 。3)取下冷卻至室溫,完全轉(zhuǎn)移至250ml碘量瓶中立即用0.1mol/L的鹽酸溶液滴定至微紅色剛好消失,紀錄鹽酸溶液的用量,記錄總酯的含量。 結(jié)果:

  氫氧化鈉消耗體積:V1=1.9ml

  鹽酸消耗體積:V2>15ml

  分析與結(jié)論:氫氧化鈉消耗體積1.9ml用來預估總酯含量,且其越大則總酯越少。由此可見,產(chǎn)酯量應該不少。

  按公式:總酯=(15-V2) X0.1X10-3mol 但是我們滴到18ml仍不見結(jié)果,并且沒有要到微紅的跡象?赡苁怯捎谂渲茖嶒炘噭⿻r出現(xiàn)問題,導致沒有測出總酯量。

  五、總結(jié)

  短短一周的微生物實習在緊張又有效率的節(jié)奏下順利的結(jié)束了。這是我們自己在老師協(xié)助下并親自動手連續(xù)完成的一些列實驗,在其中感受到了很多平時和課上很少遇到的東西,有自主,有探索,有反思,有合作

  短暫的實習轉(zhuǎn)眼而過,回顧實習生活,我在實習的過程中,既有收獲的喜悅,也有一些遺憾。喜悅是我們都在老師的指導下自主設(shè)計了方案并分工鮮明,合理掌握每一步實驗用時及時、準確測量數(shù)據(jù),最終都得到了相應的結(jié)果。而遺憾那就是對實驗有些方面的認識僅僅停留在表面,只是在看人做,聽人講如何做,未能夠親身感受、具體處理一些工作,所以未能領(lǐng)會其精髓。但時通過實習,加深了我對實驗和微生物基本知識的理解,豐富了我的微生物實驗的知識,使我對實驗有了深層次的感性和理性認識。認識到要做好實驗,既要注重理論知識的學習,更重要的是要把實踐與理論兩者緊密相結(jié)合。更進一步體會到了“實踐是最好的老師”的深刻意義。

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